Sumber materi biologi tentang sel, sel tumbuhan, sel hewan, fungsi sel, struktur sel, perbedaan sel tumbuhan dan sel hewan

Proses Sidik Jari DNA


Proses Sidik Jari DNA

Sidik Jari DNA
Sidik Jari DNA telah merevolusi investigasi kriminal untuk dijabarkan penjahat sebenarnya. Seperti menarik seperti kedengarannya, ia memiliki langkah demi langkah prosedur canggih. Artikel ini akan memberikan informasi lengkap tentang prosesnya.

Setiap orang lahir dengan identitas yang unik. Sebelumnya ia berpikir bahwa ini karakter unik hanya kualitas abstrak seperti sifat atau perilaku yang membedakan satu orang dari yang lain. Namun proses sidik jari DNA telah membuktikan bahwa ada barang bukti yang dapat membedakan antara dua individu di dunia ini. Ilmu sekuensing DNA telah mengembangkan banyak sejak profiling pertama dilakukan oleh Sir Alec Jeffreys pada tahun 1985, di Inggris. Ada beberapa kegiatan penelitian yang dilakukan sebelumnya untuk memahami proses sidik jari DNA. Sejak penemuannya di University of Leicester, ilmu genetika manusia telah membuat langkah besar dalam identifikasi pola DNA yang unik.


Prinsip Sidik Jari DNA

Informasi genetik seluruh individu disebut genom. Genom berisi urutan DNA, yang memiliki baik coding dan coding gen non. Urutan DNA dari manusia adalah 99% sama dalam setiap individu. Namun, 1% lainnya adalah apa yang membuat kita masing-masing yang unik. Urutan 1% terutama memiliki kode tertentu yang terulang seluruh urutan. Ini adalah urutan pendek dan bervariasi, dan dikenal sebagai VNTRs (Jumlah Variabel Mengulang Tandem). Frekuensi dan posisi ini mengulangi sangat bervariasi dari satu orang ke yang lain. Fingerprinting DNA menggunakan VNTRs tersebut dari sampel DNA yang tidak diketahui untuk membandingkan dan mencocokkan dengan diketahui.

Teknik Sidik Jari DNA

Proses ini dirangkum di bawah ini dengan flowchart untuk pemahaman yang lebih baik:

Langkah-langkah yang terlibat dijelaskan di bawah ini:


Langkah 1: Untuk memulainya, seseorang harus memiliki sumber sampel DNA. Sumber ini bisa menjadi sehelai rambut, air mani, darah (setetes akan bekerja juga!), Air liur, sel pipi, dll Selama investigasi kriminal rambut, air mani, atau darah tersangka dikumpulkan untuk analisa lebih lanjut.

Langkah 2: Langkah berikutnya adalah untuk mengambil sampel DNA dari sumbernya. Proses ekstraksi dirancang dengan cara memecah membran sel dan melepaskan DNA dengan lingkungan luarnya. Deterjen yang digunakan untuk tujuan ini. Mereka cenderung untuk mematahkan membran sel dengan membentuk misel dengan entitas protein dan lipid dari membran.

Langkah 3: Setelah DNA diekstrak, maka dikenakan pencernaan dengan endonuklease restriksi. Ini adalah enzim yang memotong fragmen DNA pada situs tertentu yang mengakui. Ini berarti bahwa setiap enzim restriksi (RE) mengakui urutan DNA spesifik dan luka di situs tertentu. Sebagai contoh, mari kita mempertimbangkan RE, "R" yang mengakui ACTTT urutan tertentu yang membelah antara C dan T. Dalam contoh yang diberikan, mari kita perhatikan urutan DNA beruntai ganda.

GGCAACTTT ....
CCGTTGAAA ....

R akan memotong urutan di situs berikut:
GGCAAC / TTT
CCGTTG / AAA

Ingat bahwa membelah adalah memotong untai ganda, menghasilkan fragmen DNA dengan panjang bervariasi. Fragmen ini juga disebut RFLP (Fragmen Polimorfisme Panjang Terbatas). Banyak dari fragmen akan berisi VNTRs.

Langkah 4: Fragmen ini kemudian dipisahkan oleh perbedaan panjang mereka menggunakan teknik elektroforesis gel. Teknik ini menggunakan arus listrik untuk memindahkan fragmen DNA melalui matriks gel-based. Molekul DNA bermuatan negatif (karena gugus fosfat) dan karenanya akan bergerak menuju anoda positif di set up. Matriks berbasis gel yang biasanya terbuat dari agarose yang menyediakan pori-pori kecil di dalamnya melalui mana molekul DNA dapat melakukan perjalanan. Sampel DNA yang dimuat di salah satu ujung gel dan bergerak ke lain ketika arus listrik diterapkan. Fragmen yang lebih besar melakukan perjalanan perlahan melalui gel. Namun, fragmen kecil bepergian dengan cepat dan mencapai lebih jauh dari titik sampel loading. Perhatikan bahwa fragmen dengan panjang yang sama akan melakukan perjalanan dengan kecepatan yang sama dan karenanya jarak yang sama. Pada akhir percobaan, Anda akan mendapatkan potongan DNA yang diurutkan sesuai dengan panjang mereka.

Langkah 5: The gel yang mengandung fragmen DNA tersebut kemudian direndam dalam misalnya lingkungan basa NaOH. Langkah ini membantu dalam denaturasi untai DNA ke dalam DNA beruntai tunggal. Hal ini penting untuk memudahkan langkah-langkah berikut.

Langkah 6: Langkah berikutnya adalah teknik blotting Selatan. Teknik ini melibatkan:

• Blotting gel DNA pada membran yang cocok. Yang paling umum digunakan adalah membran nitroselulosa. Namun, membran nilon juga digunakan yang memiliki kapasitas mengikat yang lebih baik. Membran ditempatkan di atas gel mengalami tekanan lembut. Hal ini dilakukan dengan menempatkan tumpukan handuk kertas, menjamin tekanan seragam pada gel. Kelembaban dari gel yang diserap oleh handuk. Karena hal ini, satu fragmen DNA beruntai ditarik dan dipindahkan pada membran. Membran sekarang menjadi replika dari pola DNA asli pada gel.

• membran ini sekarang pra-hibridisasi. Hal ini dilakukan untuk memastikan bahwa probe DNA tidak menempel pada permukaan membran tetapi untuk DNA beruntai tunggal. Umumnya, salmon DNA sperma digunakan untuk proses. Ini blok probe dari mengikat ke permukaan membran.
Tag : DNA
0 Komentar untuk "Proses Sidik Jari DNA"
Back To Top -->